Sunview® GelGreen 核酸染料(10000× 水溶液)
货号 规格
ND001-01 500μL
ND001-02 1mL
ND001-03 2mL
■ 贮藏条件
低温运输,4℃避光保存两年。
■ 产品简介
本产品是一种无诱变性、无毒的核酸染料,具有使用安全、检测灵敏等特点。其独特的油性和大分子结构使其不能穿透细胞膜进入细胞内,因而可安全替代对人体有害的溴化乙锭(EB)用于核酸电泳,其灵敏性与 EB 相同,溶于水。Sunview® GelGreen为浓缩的 10,000×染料,适用于不同大小片段的电泳染色,对核酸迁移率影响小,适用于紫外凝胶成像系统或蓝色可见光激发的凝胶观察装置。
■ 产品特点
1. 毒性低:其主要成分未发现对人体有致癌性、未被列入有毒有害品,安全有保障;
2. 灵敏高:检测灵敏度跟EB相当,能满足常规核酸电泳实验要求;
3. 稳定强:对光、水和热的稳定性跟EB相似,可加入琼脂糖凝胶中反复熔化;
4. 条带平整:不会出现 SYBR 染料常见的条带模糊和扭曲现象,条带平整锐利;
5. 观察时不需要任何额外的仪器设备或 UV 光源,可以使用现成的仪器观察;
6. 可用于 RNA 染色,DNA 或 RNA 浓度较高时还可以直接在日光下观察(需要将胶放在黑色背景下),由于避免了 UV 对DNA 的伤害,尤其适用于胶回收实验。
■ 使用方法
1. 胶染法(推荐方法):当经高温融化的琼脂糖温度降至 50-60℃时加入浓缩的 10,000× Sunview® GelGreen 混匀,使其在凝胶中的终浓度为 1×(例如:每 100 ml 琼脂糖中加入 10 µl 或者 50 ml 琼脂糖中加入 5 µl Sunview® GelGreen,加入过多可能造成背景很强)。
2. 泡染法:与溴化乙锭(EB)泡染方法相同,每 100 ml 电泳缓冲液中加入 20-30 µl Sunview® GelGreen ,染色 30 min,然后在电泳缓冲液中脱色 20-30 min。
■ 注意事项
1. 胶厚度不宜超过 0.5 cm,胶太厚会影响检测的灵敏度;
2. 本产品是一种高灵敏的染料,建议减少 DNA 的上样量,建议添加常用上样量 1/3-1/5;
3. 若按 1:10000 稀释背景高,可适当降低稀释比例到 1:20000/40000;
4. 推荐用 TBE 缓冲液替代 TAE,导电性能更好,电泳效果更佳;
5. 推荐使用质量好的琼脂糖,质量差的琼脂糖可能引起背景杂乱,条带扭曲和拖带的问题;
6. 对皮肤、眼睛有一定的刺激,操作时戴上手套。不小心接触皮肤后应该立刻清洗,并妥善处理废弃物;
7. 泡染法相对于胶染法具有更低背景的效果,但是目的条带的亮度相对于胶染法可能偏低,请酌情选择;
8. 一定要保证琼脂糖彻底熔化,尤其是在第一次熔化胶的时候,否则未熔化的小颗粒将产生跟染料相同的荧光;
9. 电泳结束后在 300 nm 左右的 UV 下观察。注意:不要使用波长为 260 nm 或 360 nm 的 UV,否则检测灵敏度会降低。